Skip to content

Zaburzenie utleniania tłuszczowego w przebiegu płodu jako przyczyna choroby wątroby u kobiet w ciąży cd

2 miesiące ago

465 words

Przebadaliśmy częstość i molekularne podstawy tego związku w 24 rodzinach, aby skorelować różne genotypy z klinicznymi objawami u matek i dzieci. Metody
Przedmioty
Przebadaliśmy 24 rodziny, w których jedno dziecko miało cechy kliniczne sugerujące defekty utleniania kwasów tłuszczowych, takie jak hipoglikemia hipoketyczna; nagła, niewyjaśniona śmierć z stłuszczoną wątrobą podczas autopsji; lub kardiomiopatia i nieprawidłowe odczyny biochemiczne lub enzymatyczne .7,10,12-16,22, zgodne z wyizolowanym niedoborem długołańcuchowej dehydrogenazy 3-hydroksyacyl-CoA lub pełnym niedoborem białka trójfunkcyjnego. Ostra stłuszczeniowa wątroba ciąży lub zespół HELLP została zdiagnozowana poprzez skierowanie położników zgodnie ze standardowymi kryteriami1-5. Badanie to zostało zatwierdzone przez komisje egzaminacyjne Uniwersytetu Waszyngtońskiego i Uniwersytetu Wake Forest, a świadomą zgodę uzyskano od osób dorosłych i rodziców dzieci.
Badania biochemiczne
Aktywność długołańcuchowej dehydrogenazy 3-hydroksyacyl-CoA i długołańcuchowej tiolazy 3-ketoacylo-CoA mierzono w surowych ekstraktach hodowanych fibroblastów skóry lub tkance wątroby, jak opisano poprzednio .8,19, 23. Ponieważ aktywne miejsca tych dwa enzymy znajdują się odpowiednio w podjednostkach . i . białka trójfunkcyjnego, a niedobór obu aktywności jest zawsze związany z brakiem aktywności długołańcuchowej hydratazy 2,3-enoilo-CoA, której miejscem aktywnym jest . podjednostka.7,9,23 Znaczne zmniejszenie długołańcuchowej aktywności tiolazy 3-ketoacylo-CoA, która jest zawarta w podjednostce . białka trifunkcyjnego, odróżnia biochemiczne fenotypy izolowanego długołańcuchowego niedoboru dehydrogenazy 3-hydroksyacyl-CoA. i całkowity niedobór triflawialnego białka.8,23 Aktywność tiolazy jest bardzo niska (0 do 20 procent normalnych poziomów) u pacjentów z niedoborem triflawialnego białka, ale jest względnie zachowana u osób z izolowanym długołańcuchowym deficytem dehydrogenazy 3-hydroksyacylo-CoA. ency (40 do 80 procent normalnych poziomów).
Badania molekularne
DNA izolowano z hodowanych fibroblastów skóry, zamrożonych tkanek lub leukocytów krwi obwodowej od 24 dzieci i różnych członków rodziny za pomocą zasadowego trawienia lizy i proteazy. RNA wyizolowano z hodowanych fibroblastów skóry lub zhomogenizowanej tkanki zgodnie ze standardowym protokołem 19. Przeprowadzono amplifikację 20 ampsonów genu kodującego podjednostkę a i 50 do 100 pz sekwencji 20 flankującej z użyciem [32P] trifosforanu deoksycytyozyny i intronów intronowych 27 do 33 pz zaprojektowanych na podstawie wcześniej zidentyfikowanej sekwencji genomowej8 (i danych niepublikowanych). Zamplifikowane fragmenty analizowano pod kątem polimorfizmów konformacji pojedynczej nici.25
Mutację Glu474Gln zidentyfikowano przez trawienie PstI8,10,26 amplifikowanego przez PCR produktu eksonu 15. Sekwencje nukleotydów określono metodą dideoksy-terminator łańcucha, albo ręcznie za pomocą radioznakowania siarką-35 lub za pomocą automatycznego sekwencera (model 373A, Applied Biosystems, Foster City, CA) ze wzmocnionymi fragmentami egzonu przez bezpośrednie sekwencjonowanie lub po subklonowaniu.
Leczenie dietetyczne
Dzieci były leczone z częstymi karmieniami niskotłuszczowej diety, w której tłuszcze były triglicerydami o średniej długości łańcucha
[patrz też: disulfiram, teosyal, anastrozol ]
[hasła pokrewne: olx strzelin, niewydolność żylna, niskorosłość ]

0 thoughts on “Zaburzenie utleniania tłuszczowego w przebiegu płodu jako przyczyna choroby wątroby u kobiet w ciąży cd”