Skip to content

Serologiczny Marker Paraneoplastic Limbic i Brain-stem Zapalenie mózgu u pacjentów z rakiem jądra czesc 4

3 miesiące ago

496 words

Objawy neurologiczne wystąpiły u tych pacjentów 3 miesiące przed i 12 i 24 miesiące po rozpoznaniu raka jąder. W przeciwieństwie do pacjentów z przeciwciałami anty-Ma2, u których wyniki badania MRI mózgu i badania płynu mózgowo-rdzeniowego były zwykle nieprawidłowe, ci trzej pacjenci mieli prawidłowe wyniki w MRI mózgu i jedno (z objawami pnia mózgu i móżdżku ) miał zmiany wskazujące na zapalenie w płynie mózgowo-rdzeniowym. Charakterystyka przeciwciał przeciwko Ma2
Figura 1. Figura 1. Analiza Western blotting i immunohistochemiczna surowicy zawierającej przeciwciała anty-Ma2. Panel A pokazuje wyniki immunoblotingu ludzkich neuronalnych białek inkubowanych z surowicą od osobnika kontrolnego i ośmiu pacjentów z rakiem jąder, którzy również mieli paraneoplastyczne limbiczne lub mózgowo-rdzeniowe zapalenie mózgu, lub jedno i drugie. Surowica wszystkich ośmiu pacjentów reagowała z białkiem neuronalnym 40 kD. Panel B pokazuje wzór reaktywności przeciwciała z ludzką tkanką mózgową. Reaktywność obejmuje jądra i cytoplazmę neuronów i jest skoncentrowana w jąderkach i perikarynie (brak barwienia kontrastowego, × 400).
Próbki surowicy od 10 pacjentów z przeciwciałami anty-Ma2 poddawały się reakcji Western blotting ekstraktu oczyszczonych ludzkich neuronów z białkiem 40 kD (Figura 1A). Próbki płynu mózgowo-rdzeniowego były dostępne od sześciu pacjentów, a wszystkie próbki również reagowały z białkiem. Żaden pacjent nie posiadał przeciwciał wyłącznie w płynie mózgowo-rdzeniowym. Wzorzec reaktywności przeciwciał w 10 próbkach surowicy badano immunohistochemicznie za pomocą zamrożonych tkanek ludzkich i szczurzych utrwalonych w metanolu-acetonie i oczyszczonej znakowanej biotyną IgG z surowicy każdego pacjenta. W tych warunkach wszystkie neurony ludzkiego i szczurzego mózgu, rdzenia kręgowego, zwojów grzbietowo-korzeniowych, jelitowych neuronów autonomicznych i komórek rdzeniowych zwojowych nadnercza wykazywały odrębne struktury podjednostkowe i cytoplazmatyczne immunoreaktywne (Figura 1B). Komórki Purkinjego i inne neurony kory móżdżku miały najsłabsze reakcje. Nie wykryto reaktywności w wątrobie, płucach i innych tkankach nieneuronalnych.
Gdy analizowano tkankę utrwaloną w formalinie, tylko rejony, które miały najsilniejsze reakcje z wiązaniem metanol-aceton były reaktywne: hipokamp, jądro migdałowate, struktury międzymetaliczne (przyśrodkowe jądro wzgórzowe i podwzgórzowe i boczny obszar podwzgórza), różne jądra tokastowe i zębate jądro móżdżku. Wstępna inkubacja tkanek z próbkami surowicy od 8 z 10 pacjentów zniosła reaktywność IgG izolowanej z surowicy od pozostałych 2 pacjentów, co sugeruje, że wszystkie próbki surowicy miały podobną swoistość immunohistochemiczną (dane nie pokazane). Przeciwciała przeciw Ma2 nie zostały zidentyfikowane w żadnej z próbek surowicy od 344 osobników kontrolnych.
Klonowanie genu kodującego antygen Ma2
Badanie przesiewowe przeciwciał anty-Ma2 zawierających surowicę za pomocą ludzkiej biblioteki faga móżdżku . ZAP umożliwiło izolację pozytywnego klonu, który odzyskano przez subklonowanie do wektora pBluescript. Po oczyszczeniu wyizolowano plazmid (p561A), który zawierał wstawkę o długości 614 bp. Sekwencja tego insertu obejmowała niepełną otwartą ramkę odczytu odpowiadającą 195 aminokwasom, z przewidywaną masą cząsteczkową 21,9 kd
[hasła pokrewne: bifidobacterium, Choroba Perthesa, disulfiram ]
[patrz też: mielopatia, mielopatia szyjna, mięsak kości ]

0 thoughts on “Serologiczny Marker Paraneoplastic Limbic i Brain-stem Zapalenie mózgu u pacjentów z rakiem jądra czesc 4”