Skip to content

Serologiczny Marker Paraneoplastic Limbic i Brain-stem Zapalenie mózgu u pacjentów z rakiem jądra ad

2 miesiące ago

588 words

U pozostałych 20% pacjentów z zespołem rak jądra występuje częściej niż oczekiwano. Ta obserwacja, wraz z wykryciem przeciwciała przeciw nowemu antygenowi neuronowemu u pacjenta z rakiem jąder i paraneoplastycznym limbicznym zapaleniem mózgu, 12 doprowadziła nas do zbadania innych przypadków tego zespołu u pacjentów z guzami jąder. Metody
Próbki surowicy i tkanki
Przeanalizowaliśmy próbki surowicy (lub próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, gdy są dostępne) od 986 mężczyzn i kobiet z histologicznie udowodnionym rakiem, którzy zostali wysłani do nas w celu przetestowania przeciwciał przeciwnowotworowych. Ponadto uzyskano 344 próbki surowicy do użycia jako kontrole od pacjentów z innymi zespołami paranowotworowymi, pacjentów z różnymi nowotworami bez takich zespołów, pacjentów ze stwardnieniem rozsianym lub układowym toczniem rumieniowatym, oraz u osób zdrowych.
Tkanki nowotworowe zostały dostarczone przez lekarzy kierujących oraz Biuro Zamówień Guza w Memorial Sloan-Kettering Cancer Center. Obejmowały nowotwory jąder od 4 pacjentów z paraneoplastycznym limficznym zapaleniem mózgu, zapaleniem mózgu pnia mózgu lub obiema; nowotwory od 85 pacjentów bez zespołów paranowotworowych (65 z guzami zarodkowymi jądra, 5 z rakiem okrężnicy, 4 z rakiem piersi, 3 z rakiem płuc, 2 z rakiem ślinianki przyusznej i 6 z rakiem drobnokomórkowym); i guzy od 8 pacjentów z innymi zespołami paranowotworowymi (4 z drobnokomórkowym rakiem płuc, 3 z rakiem jajnika i z rakiem pęcherza). Tkanki od zdrowych osobników i szczurów Wistar przetwarzano i przechowywano, jak podano w innym miejscu. 13,14 Dla analizy Western blot tkanki homogenizowano w 0,1 procentach Nonidet P-40 i inhibitorami proteazy.
Analiza immunohistochemiczna
Zamrożone skrawki szczura i tkanki ludzkie o grubości 7 .m utrwalono w 10% formalinie lub kombinacji 30% metanolu i 70% acetonu w 4 ° C i inkubowano z próbką surowicy, IgG lub płynu mózgowo-rdzeniowego od pacjenta z zastosowanie testu immunologicznego avidyna-peroksydaza-biotyna.14,15 Przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkim limfocytom T CD8 + (Dako, Carpinteria, CA) zostało użyte do zbadania immunofenotypu nacieków zapalnych w próbkach biopsji mózgu.
Aby uniknąć interferencji z endogenną IgG w badaniach immunohistochemicznych z ludzką tkanką, wykorzystano IgG, które zostało oczyszczone z próbek surowicy pacjentów i wyznakowane biotyną16. To samo IgG zastosowano do testów na odporność immunologiczną: dwie próbki surowicy zostały uznane za konkurowanie o te same epitopy, gdy wstępna inkubacja tkanki z jedną próbką znosi reaktywność IgG wyodrębnionej z innej próbki.
Wewnątrzpłytkowa synteza przeciwciał przeciwko antygenowi onkoneuronowemu Ma2
Obecność dokanałowej syntezy przeciwciał przeciwko antygenowi onkonsuronowemu, którą nazwaliśmy Ma2 (zwaną również anty-Ta) oceniano według wzoru Schüllera 17. Stosunek reaktywności przeciwciała Ma2 w płynie mózgowo-rdzeniowym do reaktywności przeciwciała Ma2 w surowicy krwi przekraczającej 2 wskazuje, że istnieje dooponowa synteza przeciwciała Ma2.
Klonowanie, izolacja i analiza sekwencji komplementarnego DNA Ma2
Surowicę od pacjenta z paranowotworową dysfunkcją mózgu i łodygi wysiewano przy gęstości 5 x 104 pfu na płytkę 150 mm i badano za pomocą ludzkiej biblioteki fagowej móżdżku . ZAP (Stratagene, La Jolla, CA). 13 Pozytywnych kolonii fagowych oczyszczono przez kilka rund przeszukiwania przeciwciał, a następnie subklonowano do wektora pBluescript zgodnie z protokołem ratowania fagów (Stratagene).
Dwuniciowy komplementarny DNA Ma2 (cDNA) oczyszczono za pomocą układu do przygotowywania midi-prep plazmidu Qiagen (Qiagen, Santa Clarita, CA) i sekwencjonowano na automatycznym sekwenatorze DNA (model ABI377, Applied Biosystems, Foster City, CA) z użyciem metody fluorescencji terminatora znakowanej barwnikiem.18
Analiza Western Blot
Rekombinowane białka fuzyjne, białka Escherichia coli i białka z tkanek ludzkich i szczurzych otrzymano jak opisano uprzednio, 10,14 poddano 10% elektroforezie w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu i przeniesiono na paski nitrocelulozowe.
[patrz też: dienogest, anastrozol, diklofenak ]
[przypisy: olx strzelin, niewydolność żylna, niskorosłość ]

0 thoughts on “Serologiczny Marker Paraneoplastic Limbic i Brain-stem Zapalenie mózgu u pacjentów z rakiem jądra ad”

  1. Ułożenie chorego na boku uchroni poszkodowanego przed zachłyśnięciem się własnymi wydzielinami.